氯霉素酶联免疫检测试剂盒使用说明
1、试验原理
氯霉素酶联免疫检测试剂盒采用免疫竞争法定量检测氯霉素。微量反应板上包被有羊抗兔抗体,加入氯霉素标准品或样品,兔抗氯霉素抗体和氯霉素酶结合物。室温孵育,抗体,抗原竞争性地结合。洗涤后加酶反应底物和显色剂,结合的酶标记物将无色的显色剂转化为蓝色产物,加入反应终止液后颜色由蓝色变为黄色。在450nm波长测量,样品中的氯霉素浓度与吸收光强度成反比。
2、使用范围
氯霉素(chloramphenicol)是一种常用的广谱抗菌素,通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抑菌作用。然而氯霉素具有严重的毒副作用。目前,我国已禁止使用。安迪斯氯霉素酶联免疫检测试剂盒是应用免疫学竞争法原理建立的一种特异、敏感的检测试剂,用于检测鸡肉、鱼、虾、蟹、牛奶、血清、内脏、饲料与蜂蜜等样本中存在的微量氯霉素,灵敏度为0.05ppb。
3、交叉反应
与常见抗生素的交叉反应:
氯霉素…………………… 100%
氯霉素碱………………… 0.5%
甲基氯霉素……………… ≤0.05%
四环素………………………≤0.01%
青霉素………………………≤0.01%
庆大霉素……………………≤0.01%
氨苄青霉素…………………≤0.01%
红霉素………………………≤0.01%
强力霉素……………………≤0.01%
4、使用单位需自备的设备及试剂
1) 设备
A. 酶标读数仪。
B. 组织粉碎机。
C. 离心机。
D. 氮吹仪。
E. 漩涡混合器。
F. 恒温水浴锅。
G. 微量移液器。
2) 试剂
A. 乙腈。
B. 乙酸乙酯。
C. 0.5mol/L氯化钠。
D. 正己烷。
E. 稀释液:0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.6)。
5、提供的材料与试剂
1) 反应板:已包被羊抗兔抗体的微量反应板,1块(8孔×12条)。
2) 标准品:氯霉素标准品,含量分别为:0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb。6瓶(0.8ml/瓶)。
3) 抗体:抗氯霉素抗体,10倍浓缩液,1瓶(10×,0.8ml)。
4) 酶结合物:氯霉素酶结合物,10倍浓缩液,1瓶(10×,0.8ml)。
5) 底物:1瓶(8ml)。
6) 显色剂:1瓶(8ml)。
7) 终止液:1瓶(8ml)。
8) 稀释液:2瓶(15ml),抗氯霉素抗体、氯霉素酶结合物的稀释。
9) 样本稀释液:1瓶(10×,25ml)。
10) 说明书:1份。